凍干粉標準菌株傳代和復壯
【冷(leng)凍(dong)管開(kai)封】 用浸過 75%酒精的脫脂(zhi)棉嚴格消(xiao)毒冷(leng)凍(dong)管蓋。
【菌株復(fu)(fu)溶】無菌環境中(zhong)旋(xuan)開裝有復(fu)(fu)溶液的(de)滴瓶(ping)蓋(gai),吸取 1ml 左(zuo)右復(fu)(fu)溶液,加入到冷凍管中(zhong)。輕(qing)輕(qing)振蕩,使凍干(gan)菌 株溶解呈懸浮狀。
【菌株復壯】用無菌吸管吸取菌懸液,轉移到復溶液滴瓶中。做好標識,在適宜溫度(du)下培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)。細(xi)菌在 30-35℃培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang) 箱中培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang) 24-48h,真菌在 20-25℃培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)箱中培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang) 24-72h(必要時(shi),可適當(dang)延長培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)時(shi)間)。
【菌(jun)株傳代(dai)】將得到的(de)菌(jun)株的(de)新鮮(xian)培(pei)養(yang)(yang)物轉接到適宜的(de)固體培(pei)養(yang)(yang)基(ji)及液(ye)體培(pei)養(yang)(yang)基(ji)中(盡量(liang)增大接種(zhong)量(liang):如用(yong)無菌(jun)吸 管(guan)吸取(qu)≥50μl 新鮮(xian)培(pei)養(yang)(yang)物至固體培(pei)養(yang)(yang)基(ji),邊移動邊緩慢(man)釋放(fang)),適宜溫度(du)下(xia)培(pei)養(yang)(yang),用(yong)以菌(jun)株的(de)保藏、傳 代(dai)及制備(bei)工作菌(jun)株。
【注意事項】
1、 菌種活化前,將冷凍管保存在(zai)低(di)溫、清潔、干燥的環(huan)境中(zhong),長時間室溫下(xia)放置會導致菌種衰退;
2、 冷凍管開(kai)封(feng)、凍干粉復溶(rong)、菌株恢復培養等操(cao)作應在無菌條(tiao)件(jian)下進行;
3、 一些菌(jun)種經過冷(leng)凍干燥保存后,延遲期較長,部分需連續兩次繼(ji)代(dai)培養才能正常生長;
4、 苛養(yang)(yang)菌的培養(yang)(yang)需采用含特定營養(yang)(yang)成(cheng)分的培養(yang)(yang)基,敬請正確選(xuan)擇,不清楚時來電詢問;
5、 某些(xie)厭(yan)(yan)氧菌的培養,自(zi)開封(feng)到接種完成,均需以(yi)無(wu)氧氣體充填,以(yi)保持厭(yan)(yan)氧狀態(tai);培養過程(cheng)中亦(yi)要保 持厭(yan)(yan)氧狀態(tai);
6、 某些菌種,如肺炎(yan)鏈球菌、流(liu)感嗜血桿菌、淋病(bing)奈(nai)瑟(se)菌等(deng)需(xu)要(yao) 5-10%CO2促進(jin)生長;
7、 如發現冷凍管蓋松動(dong)、復溶液渾(hun)濁等(deng)異常(chang)情況,應(ying)停止使用對應(ying)產品(pin)。
8、 部(bu)分菌種有致(zhi)病性、擴散(san)性,請專(zhuan)業人員在專(zhuan)業環境下有保護性操作。