產品更新-人胚腎細胞
培養基(ji) 90%DMEM-H+10%FBS
傳代方法(fa) 復蘇步(bu)驟(zou):①凍存管(guan)從液(ye)氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,迅(xun)速沒入37℃水浴鍋,搖晃凍存管(guan)加速溶(rong)解(jie)(jie),以1min內(nei)全(quan)部(bu)溶(rong)解(jie)(jie)為宜;②在超凈(jing)臺中將溶(rong)解(jie)(jie)好的(de)(de)細胞液(ye)加入到裝(zhuang)有9mL完-全(quan)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基的(de)(de)離(li)心管(guan)內(nei),1000-1200rpm離(li)心5min,棄去上清液(ye),用1-2mL完-全(quan)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基重懸細胞。③將細胞懸液(ye)加入到含有5-6mL完-全(quan)-培(pei)(pei)養(yang)(yang)基的(de)(de)T25瓶中,放入培(pei)(pei)養(yang)(yang)箱培(pei)(pei)養(yang)(yang)。
細(xi)胞(bao)(bao)傳代(dai):①將(jiang)舊培(pei)(pei)養液(ye)(ye)吸除,PBS清洗兩遍后,加入(ru)(ru)1-2mL胰(yi)(yi)酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②鏡下(xia)觀察消化(hua)情況,在細(xi)胞(bao)(bao)邊緣(yuan)縮小,貼(tie)壁松動時(shi)(可(ke)用吸管吸起些許胰(yi)(yi)酶輕輕吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)(bao)層(ceng)(ceng)某處,肉(rou)眼可(ke)見細(xi)胞(bao)(bao)層(ceng)(ceng)脫落,即消化(hua)完(wan)成,否則繼續消化(hua)),直(zhi)接吸掉胰(yi)(yi)酶,加入(ru)(ru)5-6mL完(wan)-全培(pei)(pei)養基(ji),輕輕吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)(bao)層(ceng)(ceng),把(ba)細(xi)胞(bao)(bao)層(ceng)(ceng)吹(chui)落,吹(chui)散。③將(jiang)細(xi)胞(bao)(bao)懸(xuan)液(ye)(ye)按1:2比(bi)例分到新的(de)T25瓶中,添加適當的(de)完(wan)-全培(pei)(pei)養基(ji),把(ba)細(xi)胞(bao)(bao)懸(xuan)液(ye)(ye)打(da)勻,于(yu)培(pei)(pei)養箱中培(pei)(pei)養。;④注(zhu)意培(pei)(pei)養基(ji)pH值變化(hua)和細(xi)胞(bao)(bao)密度(du),定(ding)期換液(ye)(ye)(每周2-3次),待細(xi)胞(bao)(bao)密度(du)達到80%-90%時(shi),重(zhong)復傳代(dai)操作或(huo)者凍存。
生長條件 37℃;5%CO2+95%空氣;
生長特性 貼壁生長
存儲條件 液氮
安全等級 0
形態(tai) 上(shang)皮細胞樣,多角(jiao)形,邊緣不規則,單(dan)層(ceng)貼壁生(sheng)長(chang),背(bei)景(jing)干凈