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產品更新-豬小腸上皮細胞

發布時間: 2023-06-05  點擊次數: 217次

產品更新-豬小腸上皮細胞 

 

培(pei)養基 90%DMEM-H+10%FBS


傳代方法(fa) 復(fu)蘇步驟:①凍存(cun)管(guan)從液氮或(huo)-80℃冰箱(xiang)中取出放(fang)入(ru)PE手套中,迅速沒(mei)入(ru)37℃水浴鍋,搖(yao)晃凍存(cun)管(guan)加(jia)速溶解(jie),以1min內全(quan)部溶解(jie)為宜(yi);②在超凈臺中將溶解(jie)好的(de)細(xi)(xi)胞(bao)液加(jia)入(ru)到(dao)裝有(you)9mL完-全(quan)培養基(ji)的(de)離(li)心管(guan)內,1000-1200rpm離(li)心5min,棄去(qu)上清(qing)液,用1-2mL完-全(quan)培養基(ji)重懸細(xi)(xi)胞(bao)。③將細(xi)(xi)胞(bao)懸液加(jia)入(ru)到(dao)含有(you)5-6mL完-全(quan)培養基(ji)的(de)T25瓶中,放(fang)入(ru)培養箱(xiang)培養。


細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)傳代:①將(jiang)(jiang)舊培養(yang)液吸除,PBS清洗(xi)兩(liang)遍后,加(jia)入(ru)1-2mL胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②鏡下觀察消化情況,在(zai)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)邊緣縮小,貼壁松動(dong)時(可用吸管(guan)吸起些許(xu)胰酶輕(qing)輕(qing)吹(chui)(chui)打(da)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)層(ceng)(ceng)某(mou)處,肉眼可見細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)層(ceng)(ceng)脫落,即(ji)消化完成(cheng),否(fou)則繼續消化),直接吸掉胰酶,加(jia)入(ru)5-6mL完-全培養(yang)基,輕(qing)輕(qing)吹(chui)(chui)打(da)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)層(ceng)(ceng),把細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)層(ceng)(ceng)吹(chui)(chui)落,吹(chui)(chui)散(san)。③將(jiang)(jiang)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)懸(xuan)液按(an)1:2比例分到新(xin)的T25瓶(ping)中(zhong),添加(jia)適(shi)當(dang)的完-全培養(yang)基,把細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)懸(xuan)液打(da)勻,于培養(yang)箱中(zhong)培養(yang)。;④注意培養(yang)基pH值(zhi)變化和細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)密度(du),定(ding)期(qi)換(huan)液(每周2-3次(ci)),待細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)密度(du)達到80%-90%時,重復傳代操作或(huo)者(zhe)凍存。

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生長條件 培養溫度37℃;氣體環境5%CO2+95%空氣;
生長特性 貼壁生長
存儲條件 液氮
安全等級 1
形(xing)(xing)態(tai) 上皮細胞(bao)樣,多角形(xing)(xing),不規(gui)則形(xing)(xing),邊(bian)緣不規(gui)則,單層貼(tie)壁生長(chang),背景干凈,無空泡

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