產品更新-小鼠小腸上皮細胞
培養基 90%DMEM-H+10%FBS
傳代方法 復(fu)蘇步驟:①凍(dong)存管(guan)從液(ye)(ye)氮或(huo)-80℃冰箱中取(qu)出放入PE手套中,迅速沒(mei)入37℃水(shui)浴鍋,搖晃凍(dong)存管(guan)加速溶(rong)解,以1min內全(quan)部溶(rong)解為宜;②在(zai)超凈臺中將溶(rong)解好的(de)細胞液(ye)(ye)加入到(dao)裝有(you)9mL完(wan)-全(quan)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)的(de)離心管(guan)內,1000-1200rpm離心5min,棄去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)(ye),用1-2mL完(wan)-全(quan)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)重(zhong)懸細胞。③將細胞懸液(ye)(ye)加入到(dao)含有(you)5-6mL完(wan)-全(quan)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)的(de)T25瓶中,放入培(pei)(pei)養(yang)(yang)箱培(pei)(pei)養(yang)(yang)。
細(xi)(xi)(xi)胞(bao)傳(chuan)(chuan)代(dai):①將(jiang)舊培(pei)(pei)養(yang)液(ye)吸(xi)除(chu),PBS清洗兩遍后,加入1-2mL胰(yi)酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②鏡(jing)下觀察消(xiao)化情況,在細(xi)(xi)(xi)胞(bao)邊緣縮小(xiao),貼(tie)壁松動(dong)時(shi)(可(ke)用吸(xi)管吸(xi)起些許胰(yi)酶輕輕吹(chui)(chui)打細(xi)(xi)(xi)胞(bao)層(ceng)某處,肉眼可(ke)見細(xi)(xi)(xi)胞(bao)層(ceng)脫落,即消(xiao)化完成(cheng),否(fou)則(ze)繼(ji)續消(xiao)化),直接吸(xi)掉胰(yi)酶,加入5-6mL完-全培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji),輕輕吹(chui)(chui)打細(xi)(xi)(xi)胞(bao)層(ceng),把(ba)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)層(ceng)吹(chui)(chui)落,吹(chui)(chui)散。③將(jiang)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)按1:2比例分到新的T25瓶(ping)中,添加適(shi)當的完-全培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji),把(ba)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)打勻,于培(pei)(pei)養(yang)箱中培(pei)(pei)養(yang)。;④注意(yi)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)pH值變(bian)化和(he)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)密度,定(ding)期(qi)換液(ye)(每周2-3次),待細(xi)(xi)(xi)胞(bao)密度達(da)到80%-90%時(shi),重復(fu)傳(chuan)(chuan)代(dai)操作或者凍存。
生長條件 37℃;5%CO2+95%空氣;
生長特性 貼壁生長
存儲條件 液氮
類型 貼壁生長
安全等級 1
形(xing)態 上皮細胞樣,梭形(xing),邊緣不(bu)規則,單層貼壁生長