產品更新-小鼠腦微血管內皮細胞

培養基 90%DMEM-H+10%FBS
傳代方法 復(fu)蘇(su)步(bu)驟：①凍(dong)存管從液(ye)氮或-80℃冰(bing)箱中取出放(fang)入(ru)PE手套(tao)中，迅(xun)速沒入(ru)37℃水浴鍋(guo)，搖晃凍(dong)存管加(jia)速溶解(jie)，以(yi)1min內全部(bu)溶解(jie)為宜；②在超凈臺中將溶解(jie)好(hao)的細(xi)-胞(bao)(bao)液(ye)加(jia)入(ru)到裝有9mL完(wan)-全培(pei)養基(ji)的離(li)心管內，1000-1200rpm離(li)心5min，棄去上清液(ye)，用1-2mL完(wan)-全培(pei)養基(ji)重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)(bao)。③將細(xi)胞(bao)(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)到含有5-6mL完(wan)-全培(pei)養基(ji)的T25瓶中，放(fang)入(ru)培(pei)養箱培(pei)養。

細(xi)(xi)胞(bao)(bao)傳(chuan)代：①將舊培(pei)養(yang)液(ye)吸(xi)除，PBS清洗兩遍(bian)后(hou)，加(jia)入1-2mL胰(yi)酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②鏡(jing)下觀察消化情(qing)況(kuang)，在細(xi)(xi)胞(bao)(bao)邊(bian)緣縮(suo)小，貼壁松動時（可(ke)用吸(xi)管(guan)吸(xi)起(qi)些許胰(yi)酶輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)吹打細(xi)(xi)胞(bao)(bao)層某處，肉眼可(ke)見細(xi)(xi)胞(bao)(bao)層脫落(luo)，即消化完(wan)成，否則(ze)繼續(xu)消化），直接吸(xi)掉(diao)胰(yi)酶，加(jia)入5-6mL完(wan)-全(quan)培(pei)養(yang)基(ji)，輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)吹打細(xi)(xi)胞(bao)(bao)層，把細(xi)(xi)胞(bao)(bao)層吹落(luo)，吹散。③將細(xi)(xi)胞(bao)(bao)懸(xuan)液(ye)按1:2比例分到(dao)新的(de)T25瓶中，添(tian)加(jia)適當的(de)完(wan)-全(quan)培(pei)養(yang)基(ji)，把細(xi)(xi)胞(bao)(bao)懸(xuan)液(ye)打勻，于培(pei)養(yang)箱中培(pei)養(yang)。；④注(zhu)意培(pei)養(yang)基(ji)pH值變化和細(xi)(xi)胞(bao)(bao)密度，定期換液(ye)（每周(zhou)2-3次(ci)），待細(xi)(xi)胞(bao)(bao)密度達到(dao)80%-90%時，重復傳(chuan)代操作或者凍(dong)存。

生長條件 培養溫度37℃；氣體環境5%CO2+95%空氣；
生長特性 貼壁生長
存儲條件 液氮
類型 貼壁生長
安全等級 1
形態 內皮細胞，短梭形，不規則形，邊緣不規則，單層貼壁生長，背景干凈
分離基物 bEnd.3小(xiao)鼠腦微血管內(nei)皮細胞是通過(guo)轉(zhuan)染NTKmT逆轉(zhuan)錄病(bing)毒載體轉(zhuan)化而來的，它(ta)表達了(le)多瘤病(bing)毒中T抗原。