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Western Blotting檢測,WB實驗代測,WB實驗服務

簡要(yao)描述(shu):信帆生物提(ti)供(gong)(gong) Western Blotting檢測服(fu)務,全程提(ti)供(gong)(gong)技術(shu)指(zhi)導(dao),代測時間為兩周,歡(huan)迎!Western Blotting檢測,WB實驗(yan)代測,WB實驗(yan)服(fu)務所有產品僅供(gong)(gong)科研使用,不得用于食用,醫療等其它用途。

產品型號:

所屬分類:實驗代測

更新時間(jian):2017-03-20

廠商性質:經銷商

詳情介紹

信(xin)帆生物提供 Western Blotting檢測(ce)服務(wu),全程(cheng)提供技術指(zhi)導,代測(ce)時(shi)間為兩周,歡(huan)迎!Western Blotting檢測(ce),WB實驗代測(ce),WB實驗服務(wu)

Western Blotting檢(jian)測(ce),WB實驗代(dai)測(ce),WB實驗服務

免(mian)疫印(yin)跡(immunoblotting)又稱蛋白質(zhi)印(yin)跡(Western blotting),它是(shi)根據抗原抗體(ti)的特異(yi)性結合(he)檢

測(ce)復(fu)雜樣品中的(de)某種(zhong)(zhong)蛋白的(de)方法(fa)。該法(fa)是在(zai)凝(ning)膠電泳和(he)固相免疫測(ce)定技術基礎上發(fa)展起來的(de)一(yi)種(zhong)(zhong)新(xin)的(de)免疫

生化技術。由于(yu)免疫印跡具有SDS-PAGE 的(de)高分辨(bian)力和固相免疫測定的(de)高特異性(xing)和敏感性(xing),現已成為(wei)蛋白分

析的一種常(chang)規技術。免疫(yi)印跡常(chang)用于(yu)鑒定某(mou)種蛋(dan)白,并(bing)能對蛋(dan)白進行定性(xing)和半(ban)定量分析。

凝膠遷移或電泳遷移率(lv)實驗(EMSA-electrophoretic ;mobility shift assay)是(shi)一(yi)種研(yan)究DNA 結合蛋(dan)

白和其相(xiang)關(guan)的(de)DNA 結合序列(lie)相(xiang)互作用(yong)的(de)技術,可用(yong)于定性(xing)和定量分析。這一技術zui初用(yong)于研(yan)究DNA 結合蛋白,目前已用(yong)于(yu)研究RNA 結(jie)合蛋(dan)白和特定的RNA 序(xu)列(lie)的相互作(zuo)用(yong)。

 

項目

市場價(元

優惠價(元)

說明

Western blot 檢測

 1500元/膜

電訊元/膜

 每張膜1--8樣本(一抗需確認)

EMSA 800 

 2800元/膜 

電訊(xun)元/膜(mo)

 每張膜1--8樣(yang)本(ben)(探針及(ji)試劑需確認)

 

 Western Blotting 技術服務

 

 

Western blot樣(yang)本(ben)要求

客戶需新鮮或正確保存的蛋白樣品, 檢測目的蛋白的一抗(或由本公司代購)。樣品要求為:

 

1、裂解樣品(pin)總蛋白量>500ug/樣品(pin)。

2、細胞樣品總蛋白濃度>1mg/ml。

3、組織(zhi)樣品總蛋白濃度(du)>10-15mg/ml。

 

Western blot結果及數據(ju)提供

內參蛋(dan)白(bai)(bai)和(he)目的蛋(dan)白(bai)(bai)曝光膠片各一(yi)張(zhang),可提供掃描(miao)圖,實(shi)驗(yan)(yan)報(bao)告,包括(kuo)整個試驗(yan)(yan)流程(cheng)所涉及(ji)的實(shi)驗(yan)(yan)數據和(he)實(shi)驗(yan)(yan)步(bu)驟。如需進行蛋(dan)白(bai)(bai)純(chun)化服務,將提供檢測(ce)報(bao)告


服務內容

我們提供從蛋白制備、蛋白電泳到Western blot檢測的全流程服務,如需要還可進行灰度分析。

說明

1、建(jian)議提供目(mu)的(de)蛋白(bai)陽(yang)性(xing)表達(da)樣品(純蛋白(bai)或(huo)有(you)陽(yang)性(xing)表達(da)的(de)細胞(bao)或(huo)組織)作為陽(yang)性(xing)對照。

2、每張膜檢測(ce)1-8個樣(yang)品(pin)。

3、如果一(yi)抗由客戶提(ti)供,請(qing)在正確條件下保存(cun),避免污染及反復凍融。

 


 關(guan)于Western blot實驗異常(chang)分析


『無信(xin)號』

原因建議
一抗與二抗不匹配選擇針對一抗來源種屬制備的二抗;
一抗不識別目的的種屬的蛋白

1)檢查抗體的說明書,適用范圍內是否包含目的種屬
2)使用陽性(xing)對照(zhao)來(lai)檢查抗體質量

一抗或二抗不足,沒有足夠的抗體結合到目的蛋白

1)降低抗體稀釋倍數,增加抗體濃度
2)延長孵育時間

封閉劑與一抗有交叉反應改變封閉劑
抗原不足

1)每個泳道加入20-30ug總蛋白
2)制備樣品要使用蛋白酶(mei)抑(yi)制物(wu)及使用陽(yang)性對照

在檢測的組織內目的蛋白表達水平低檢測樣本不表達目的蛋白選擇表達量高的細胞作為陽性對照,用于確定檢測樣本是否為陰性,也可更換細胞系
蛋白轉膜效率低

1)利用麗春紅檢測轉膜效率;檢查轉移裝置是否電極弄反
2)轉(zhuan)移(yi)前膜是(shi)否用甲醇侵泡過

膜過渡洗滌減少洗滌時間和強度
疊氮鈉抑制二抗活性二抗稀釋液內不用疊氮鈉

 

 

『沒有特異條帶』

原因建議
細胞系傳代過多后蛋白表達譜發送變化1)使用未傳代或傳代次數較少的細胞系進行樣品制備
蛋白本身有很多修飾1)查閱文獻,確定目的蛋白是否存在多種修飾
蛋白被消化或者降解1)蛋白樣品確保未被污染,確保含有蛋白酶抑制劑
所檢測蛋白存在多種剪接體,導致分子量大小不同1)查閱文獻或者通過搜索數據庫來確定該蛋白是否存在多種長度不同的編碼mRNA
一抗或二抗濃度高1)減低抗體濃度
洗滌不夠1)充分洗滌

 

 

『條帶大小不正確(que)』

原因建議
目的蛋白被降解確保蛋白樣品未被污染,確保含有蛋白酶抑制劑
存在不同的剪接體查閱文獻或者通過搜索數據庫來確定該蛋白是否存在多種長度不同的編碼mRNA
重組蛋白檢測是否存在額外加入的蛋白
特殊蛋白如MDM2等仔細閱讀抗體說明書

 

尊敬的客戶:

本(ben)公(gong)(gong)司(si)有放(fang)射免(mian)疫(yi)(yi)技術服(fu)務(wu)、蛋白質組(zu)(zu)學服(fu)務(wu)、免(mian)疫(yi)(yi)組(zu)(zu)化(hua)、PCR技術服(fu)務(wu)、生物信息學數據分析等,如果您(nin)想(xiang)了解Western blot的(de)(de)更多(duo)內容或者其他服(fu)務(wu)信息,您(nin)可以(yi)本(ben)公(gong)(gong)司(si)的(de)(de)了解更多(duo)產品的(de)(de)詳(xiang)細信息,至善至美(mei)的(de)(de)服(fu)務(wu)是我(wo)們永無止境的(de)(de)追求,歡迎新老客戶放(fang)心選購(gou)自己心儀產品,我(wo)們將竭誠為您(nin)服(fu)務(wu)!

所有產品僅供科研使(shi)用,不得用于食用,醫療等其它用途。



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