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實時熒光定量PCR檢測

簡要(yao)描(miao)述:Real -Time PCR,即實(shi)(shi)時監(jian)測(ce)PCR擴增(zeng)產物(wu)并(bing)進(jin)行解析的(de)方法,它是在PCR反應體系(xi)中加入(ru)熒(ying)光(guang)物(wu)質,并(bing)通過Real -Time PCR檢測(ce)系(xi)統對PCR反應進(jin)程(cheng)中的(de)熒(ying)光(guang)信號強度進(jin)行實(shi)(shi)時監(jian)測(ce),終對實(shi)(shi)驗數據進(jin)行分析處理(li)的(de)方法。實(shi)(shi)時熒(ying)光(guang)定量(liang)PCR檢測(ce)實(shi)(shi)僅供(gong)科研使(shi)用,不得用于食用,醫療等其它用途(tu)。

產品型號:

所屬分類:PCR技(ji)術服務

更新時間:2023-04-19

廠商性質:經銷商

詳(xiang)情介(jie)紹

信帆(fan)生物提(ti)(ti)供(gong)RT-PCR檢測,實時熒光定量PCR實驗(yan)檢測測,RT-PCR代測。客戶只需要提(ti)(ti)供(gong)樣(yang)本,其他(ta)所有試(shi)劑都由本公司提(ti)(ti)供(gong)。一般7-10天出結果,提(ti)(ti)供(gong)原(yuan)始數據,分析數據,實驗(yan)報告,實驗(yan)室所用儀器(qi)型號,圖片,動力擴增曲線等(deng)。

Real-Time PCR,即實時監測PCR擴增產物并(bing)進行(xing)解析(xi)的方法,它(ta)是(shi)在PCR反(fan)應體系中加入熒光物質(zhi),并(bing)通過Real-Time PCR檢測系統(tong)對PCR反(fan)應進程中的熒光信號(hao)強度進行(xing)實時監測,終對實驗(yan)數據進行(xing)分析(xi)處理的方法。Real-Time PCR自(zi)1996年(nian)由美國Applied Biosystems公司推出以來,廣泛(fan)應用于生物研究的各個領(ling)域。目(mu)前主(zhu)要有SYBR Green 染料、Taqman探(tan)針法兩種。

服務內容:

通過用SYBR熒光(guang)染料法或(huo)者TaqMan熒光(guang)探針法,我們能為客戶提供實(shi)時熒光(guang)定量PCR全套(tao)技術服務(wu)。同時我們將提供給客戶完整的(de)實(shi)驗(yan)資料和(he)分析步驟,客戶只(zhi)需提供標(biao)本和(he)標(biao)本的(de)基(ji)本信息。

實時熒光定量PCR檢測技術優勢:

1. 使用(yong)進(jin)口穩(wen)定(ding)的定(ding)量PCR儀

2. 核(he)心試劑(ji)采(cai)用原裝試劑(ji),實驗結果準確,重復性好。

3. 豐富的qPCR經(jing)驗,基因類(lei)別有DNA、mRNA、miRNA等;物種類(lei)別有人、鼠(shu)、雞、牧草(cao)、酵母(mu)菌(jun)、金黃色(se)葡萄(tao)菌(jun)等。

客戶須知:

客戶須在實驗開(kai)始前(qian)確保(bao)其提供材(cai)料的數量和質(zhi)量,并提供相關信息,客戶應當清楚要檢(jian)測的成份是(shi)否足夠穩定;

盡可(ke)能新(xin)鮮和足量(liang)的組織(50-100mg)、細胞樣品(106)或血清,或直(zhi)接提(ti)供純化(hua)好的總(zong)RNA(≥0.5μg/樣品);

所需要檢測mRNA注(zhu)冊(ce)號和名稱;

服務承諾:

我方對實(shi)驗(yan)結(jie)果以及客戶(hu)(hu)所提供的(de)資料保密,未經客戶(hu)(hu)許可(ke),我方不(bu)得將客戶(hu)(hu)的(de)實(shi)驗(yan)內容、實(shi)驗(yan)結(jie)果和相關信息對外(wai)公布。

本公司將在收(shou)到客(ke)戶樣本后并簽訂合同的第二個工作日起開始(shi)檢測工作。

提(ti)供給客戶(hu)原始實驗數(shu)據(ju)以及詳細的實驗流程(cheng)及報告。

RT-PCR實(shi)驗流程:

1.實驗用品準備;

2.樣本(ben)總RNA提取;

3.RNA濃度(du)檢測;

4.反轉錄;

5.數據(ju)分析及結論。

實時熒光定量PCR檢測注意事項:

1)所(suo)用(yong)的所(suo)有溶液(ye)都應該沒(mei)有核酸(suan)和(he)(或(huo))核酸(suan)酶(DNase和(he)RNase)污染。

2)所有PCR試劑中使用的水都應該(gai)是高(gao)質量的-新鮮蒸餾的去離子水,用0.22μm過濾的,并且是高(gao)壓滅(mie)菌。

3)在20℃到25℃貯存的試劑(ji)建議加(jia)點(dian)像疊(die)氮鈉一類(lei)的抗微生(sheng)物劑(ji),在擴增試劑(ji)或樣(yang)品(pin)制備試劑(ji)中(zhong)加(jia)入0.025%的疊(die)氮鈉不(bu)抑制擴增反應。

4)所用試(shi)劑(ji)都應該(gai)以大體積配制(zhi),實驗一下看試(shi)劑(ji)是(shi)否滿意,然后分裝(zhuang)成僅夠一次使用的量進行貯(zhu)存(cun)。

5)所有試劑和樣(yang)品準備過程中都要使(shi)用一次性滅(mie)菌的瓶(ping)子(zi)和管子(zi)。

6)新配制的(de)試劑在用于準(zhun)備新的(de)標本之前應該加以檢驗。

7)樣品準備(bei)和前PCR區所使用的移液(ye)管在不使用時都應該小心(xin)保存。

熒光定量PCR中的一些術語:

CT值:熒光信號有統計意義顯(xian)著(zhu)增長(即穿過閾值線)時(shi)的(de)循(xun)環次(ci)數(shu)(shu),或者說是從基線到指數(shu)(shu)增長的(de)拐點所對應的(de)循(xun)環次(ci)數(shu)(shu)。

閾(yu)值(zhi)(zhi):閾(yu)值(zhi)(zhi)的(de)默認(ren)設置(zhi)是3-15個循環的(de)熒光信(xin)號的(de)標準(zhun)偏差(cha)的(de)10倍。

CT值(zhi)與起始模板的量成線性關系。

所有產品僅供科研使用,不得用于食用,醫療等其它用途。





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